Tăng sản thượng thận bẩm sinh do thiếu hụt enzym 21-hydroxylase là bệnh di truyền lặn nhiễm sắc thể
thường do đột biến gen CYP21A2. Mục tiêu: Phân tích kiểu gen bệnh nhân bị bệnh tăng sản thượng thận
bẩm sinh thể thiếu 21-hydroxylase thể mất muối nặng và các thành viên gia đình bằng phương pháp giải
trình tự gen và MLPA. Đối tượng và phương pháp: Phân tích đột biến gen CYP21A2 cho 27 bệnh nhân và
60 thành viên gia đình bị bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh thể mất muối nặng bằng phương pháp giải
trình tự gen và MLPA. Lập phả hệ cho từng gia đình. Kết quả: 100% bệnh nhân tìm thấy đột biến, 5 loại đột
biến được phát hiện, đột biến điểm chiếm tỷ lệ cao 61,1%, trong đó đột biến R356W chiếm tỷ lệ cao nhất
40,7%, IVS2 - 13A/C > G chiếm 9,3%, Q318X chiếm 7,4% và S125X chiếm 3,7%; Đột biến mất đoạn chiếm
tỉ lệ 38,9%. 96,7% (58/60) thành viên gia đình mang gen đột biến dị hợp tử. 100% phả hệ chỉ có 1 thế hệ bị
mắc bệnh, trong đó không có gia đình có hai con cùng bị bệnh.
8 trang |
Chia sẻ: thuyduongbt11 | Ngày: 14/06/2022 | Lượt xem: 417 | Lượt tải: 0
Bạn đang xem nội dung tài liệu Đặc điểm kiểu gen CYP21A2 của gia đình bệnh nhân tăng sản thượng thận bẩm sinh thể thiếu 21-hydroxylase thể mất muối nặng, để tải tài liệu về máy bạn click vào nút DOWNLOAD ở trên
TCNCYH 115 (6) - 2018 45
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
ĐẶC ĐIỂM KIỂU GEN CYP21A2 CỦA GIA ĐÌNH BỆNH NHÂN
TĂNG SẢN THƯỢNG THẬN BẨM SINH THỂ THIẾU
21-HYDROXYLASE THỂ MẤT MUỐI NẶNG
Ngô Thị Thu Hương1, Nguyễn Phú Đạt1,
Trần Huy Thịnh1, Vũ Chí Dũng1,2, Trần Vân Khánh1
1Trường Đại học Y Hà Nội, 2Bệnh viện Nhi Trung ương
Tăng sản thượng thận bẩm sinh do thiếu hụt enzym 21-hydroxylase là bệnh di truyền lặn nhiễm sắc thể
thường do đột biến gen CYP21A2. Mục tiêu: Phân tích kiểu gen bệnh nhân bị bệnh tăng sản thượng thận
bẩm sinh thể thiếu 21-hydroxylase thể mất muối nặng và các thành viên gia đình bằng phương pháp giải
trình tự gen và MLPA. Đối tượng và phương pháp: Phân tích đột biến gen CYP21A2 cho 27 bệnh nhân và
60 thành viên gia đình bị bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh thể mất muối nặng bằng phương pháp giải
trình tự gen và MLPA. Lập phả hệ cho từng gia đình. Kết quả: 100% bệnh nhân tìm thấy đột biến, 5 loại đột
biến được phát hiện, đột biến điểm chiếm tỷ lệ cao 61,1%, trong đó đột biến R356W chiếm tỷ lệ cao nhất
40,7%, IVS2 - 13A/C > G chiếm 9,3%, Q318X chiếm 7,4% và S125X chiếm 3,7%; Đột biến mất đoạn chiếm
tỉ lệ 38,9%. 96,7% (58/60) thành viên gia đình mang gen đột biến dị hợp tử. 100% phả hệ chỉ có 1 thế hệ bị
mắc bệnh, trong đó không có gia đình có hai con cùng bị bệnh.
Từ khóa: Tăng sản thượng thận bẩm sinh, đột biến gen CYP21A2, thể mất muối
I. ĐẶT VẤN ĐỀ
Tăng sản thượng thận bẩm sinh
(congenital adrenal hyperplasia) thể thiếu
enzym 21-OH là bệnh lý di truyền do đột biến
gen lặn nằm trên nhiễm sắc thể số 6, bệnh
gây nên rối loạn quá trình sinh tổng hợp
hormon vỏ thượng thận gây bệnh cảnh lâm
sàng cơn suy thượng thận cấp hoặc nam hóa
ở trẻ gái, dậy thì sớm giả ở trẻ trai [1; 2].
Theo nghiên cứu của Lee và cộng sự có
ước tính tỷ lệ người mang gen bệnh tăng sản
thượng thận bẩm sinh thể dị hợp tử là 11,2-
12,6%/1.000 hay tỷ lệ 1/83 đối với quần thể
người Trung Quốc [3]. Trong khi các báo cáo
khác trên thế giới thì tỷ lệ chung người mang
gen dị hợp tử là 1/55 [4; 5]. Trong xã hội, phần
lớn bố mẹ đều là người lành mang gen bệnh
thì khả năng sinh con bị bệnh là 25%, 50%
người lành mang gen bệnh. Đến nay, đã có
hơn 100 đột biến đã được công bố gây bệnh
trên gen CYP21A2 thường gặp là đột biến mất
đoạn, chuyển đoạn, nhân đoạn, đột biến điểm
trong đó đột biến điểm chiếm tỷ lệ cao [2].
Ở Việt Nam, đã có nhiều nghiên cứu về
bệnh tăng sản thượng thận bẩm sinh, nhưng
những nghiên cứu về gen mới được công bố
trong những năm gần đây. Tăng sản thượng
thận bẩm sinh thể mất muối nặng, nếu không
được chẩn đoán sớm và điều trị kịp thời làm
tăng nguy cơ tử vong của trẻ hoặc di chứng
bại não sau này. Nhờ sự phát triển của kỹ
thuật khoa học nên phương pháp PCR, MLPA
đã giúp phát hiện các đột biến mất đoạn và
giải trình tự gen để phát hiện đột biến điểm
giúp cho việc phát hiện sớm bệnh để điều trị
Địa chỉ liên hệ: Ngô Thị Thu Hương, Bộ môn Nhi, Trường
Đại học Y Hà Nội
Email: thuhuong0380@gmail.com
Ngày nhận: 26/7/2018
Ngày được chấp thuận: 30/8/2018
46 TCNCYH 115 (6) - 2018
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
cho bệnh nhân, với các thành viên gia đình
kết quả là bằng chứng y học để tư vấn di
truyền và chẩn đoán trước sinh cho các gia
đình khi họ mang thai giúp cho điều trị và
quản lý bệnh đạt hiệu quả cao, tránh tử vong
cho trẻ và giảm tỷ lệ mắc bệnh trong cộng
đồng. Xuất phát từ thực tiễn trên, nghiên cứu
được thực hiện với mục tiêu: Phân tích kiểu
gen CYP21A2 của các thành viên gia đình
bệnh nhân tăng sản thượng thận bẩm sinh
thể thiếu 21-hydroxylase thể mất muối nặng
bằng phương pháp giải trình tự gen và MLPA.
II. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP
1. Đối tượng: gồm 27 gia đình.
27 bệnh nhân bị tăng sản thượng thận
bẩm sinh thể mất muối nặng đang điều trị nội
và ngoại trú tại Khoa Nội tiết - Chuyển hóa- Di
truyền Bệnh viện Nhi Trung ương.
60 thành viên gia đình gồm 27 người bố,
27 người mẹ và 6 anh, chị, em ruột của bệnh
nhân.
Tiêu chuẩn chẩn đoán
Bệnh nhân có biểu hiện mất muối, mất
nước mạn tính, xạm da, Biểu hiện mơ hồ giới
tính sau sinh ở trẻ gái và dậy thì sớm ở trẻ
trai. Điện giải đồ máu có rối loạn: Na+ giảm và
K+ tăng; Nồng độ 17 - OH tăng trên 10.000
ng/dl. Testosterone tăng > 1ng/ml.
2. Phương pháp
Lập phả hệ cho từng gia đình: Phỏng
vấn để lập phả hệ cho từng gia đình. Sử dụng
các ký hiệu vẽ phả hệ theo qui định quốc tế
của hội nghị di truyền người lần thứ 19.
Tách chiết DNA: Mỗi thành viên được lấy
2ml máu ngoại vi chống đông bằng EDTA;
DNA chiết tách từ bạch cầu lympho máu ngoại
vi theo quy trình phenol/chloroform. Các mẫu
DNA được tiến hành đo nồng độ và độ tinh
sạch bằng máy Nano- Drop, những mẫu DNA
đạt chuẩn OD280/OD260 ≥ 1,8 được sử dụng
để phân tích gen.
Kỹ thuật PCR: Sử dụng cặp mồi đặc hiệu
cho gen CYP21A2 cho vị trí đột biến đã được
xác định trước từ bệnh nhân bị bệnh tăng sản
thượng thận bẩm sinh trong gia đình, để
khuếch đại vị trí đột biến. Chu trình nhiệt phản
ứng PCR: 90o - 10 giây, [58o - 10 giây, 55o -
15 giây, 72o - 2 phút] x 30 chu kỳ.
Kỹ thuật MLPA: Sử dụng kit MLPA
P050B2 (MRC- Holland) sàng lọc 06 đột biến
thường gặp: P30L (Exon 1), mất đoạn 8bp
(Exon 3), I172N (Exon 4), exon 6 Cluster
(Exon 6), Q318 (Exon 8), mất toàn bộ gene
CYP21A2, mất đoạn 30Kb (Exon 3 hybrid).
Probe hỗn hợp P050 - B2 bao gồm 5 probe
cho exon 1, 3, 4, 6 và 8 của gene CYP21A2,
tương đương với các đột biến mất đoạn 8bp,
I172, E6 cluster và Q318. Sản phẩm khuếch
đại probe, được điện di mao quản huỳnh
quang trên máy giải trình tự để phân tích kết
quả.
Kỹ thuật giải trình tự gen (sequencing):
Sản phẩm PCR được tinh sạch và được giải
trình tự trên máy ABI -3100 tại Trung tâm
nghiên cứu Gen - Protein, Trường Đại học Y
Hà Nội. Kết quả được phân tích bằng phần
mềm CLC.
3. Đạo đức nghiên cứu
Nghiên cứu tuân thủ chặt chẽ theo đạo
đức nghiên cứu Y học. Bệnh nhân và gia đình
bệnh nhân hoàn toàn tự nguyện tham gia vào
nghiên cứu và có quyền rút lui khỏi nghiên
cứu khi không đồng ý tiếp tục tham gia. Bệnh
nhân và gia đình được thông báo về kết quả
TCNCYH 115 (6) - 2018 47
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
xét nghiệm gen và được tư vấn di truyền. Các
thông tin cá nhân, kết quả chẩn đoán hoàn
toàn được đảm bảo bí mật.
III. KẾT QUẢ
Phân tích kết quả kiểu gen của 27 bệnh
nhân tăng sản thượng thận bẩm sinh thể thiếu
enzym 21 - OH ở thể mất muối nặng được thể
hiện ở bảng sau.
Kết quả phân tích gen ở bảng 1 cho thấy
các dạng đột biến R356W có tỷ lệ cao 40,7%,
IVS2 - 13A/C > G tỷ lệ: 9,3%, đột biến mất đoạn
lớn tỷ lệ: 38,9%. Có 2 bệnh nhân mang 2 gen dị
hợp tử trên cùng alen Q318X và R356W.
Bảng 1. Kiểu gen đột biến được phát hiện ở nhóm bệnh nhân
Exon/
intron
Các dạng đột biến Đồng hợp tử (n) Dị hợp tử (n) % alen đột biến
Intron IVS2 - 13A/C > G 2(4) 1 (1) 5 (9,3)
Ex8 R356W 9 (18) 4 (4) 22 (40,7)
Ex8 Q318X 0 3*(4) 4(7,4)
Ex3 S125X 1(2) 0 2(3,7)
- Xóa đoạn lớn 10 (20) 1(1) 21 (38,9)
Tổng số đột biến 22(44) 9(10)
56/54 alen đột biến
(100%)
Tổng số bệnh nhân 27 (54)
*: Hai đột biến dị hợp tử trên cùng 1 alen
Số lượng alen mang đột biến
Bảng 2. Kiểu gen đột biến được phát hiện ở nhóm các thành viên gia đình bệnh nhân
Thành viên gia đình Mang gen Không mang gen Tổng số
Bố 27 0 27
Mẹ 27 0 27
Anh trai 2 1 3
Chị gái 1 1 2
Em gái 1 0 1
Tổng số 58 2 60
Trong nghiên cứu này, 60 thành viên của gia đình là những người hoàn toàn bình thường về
lâm sàng được xét nghiệm tìm đột biến gen, có 58/60 (96,7%) thành viên được phát hiện có
mang gen đột biến; 2/60 (3,3%) thành viên không mang gen đột biến.
48 TCNCYH 115 (6) - 2018
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
Bảng 3. Các dạng đột biến của các thành viên gia đình bệnh nhân
Điểm đột biến Bố Mẹ Chị gái Em gái Anh trai Tổng số
IVS2 - 13A/C > G 2 3 0 0 0 5
R356W 12 11 0 1 1 25
Q318X 3 2 0 0 0 5
S125X 1 1 0 0 0 2
Mất đoạn 10 11 1 0 1 23
Tổng 28 28 1 1 2 60
Nghiên cứu phát hiện được 5 loại đột biến ở 58 thành viên của gia đình bệnh nhân. Trong đó
đột biến điểm chiếm 37/60 (61,7%), đột biến mất đoạn chiếm 38,3%. 1 người bố và 1 người mẹ
mang 2 đột biến dị hợp tử R356W và Q318X trên cùng 1 alen. Trong số các loại đột biến, đột
biến R356W có tỷ lệ cao 25/60 (41,7%) thành viên có đột biến.
Bảng 4. Đặc điểm lâm sàng của bệnh nhân
Đặc điểm Nam Nữ Tổng
Xạm da 3 4 7
Cơn suy thượng thận cấp 0 0 0
Dậy thì sớm 1 0 3
Hội chứng cường androgen 0 2 2
Âm vật phì đại ( sau phẫu thuật) 0 1 1
Gia đình có 1 con bị bệnh 0 0 27
Gia đình có 2 con bị bệnh 0 0 0
Thăm khám và phân tích phả hệ của 27 gia đình có con bị bệnh tăng sản thượng thận bẩm
sinh thể mất muối, 100% các gia đình có con bị bệnh ở cùng một thế hệ, không có gia đình nào
có 2 con bị bệnh. Tất cả 27 bệnh nhân đang được khám và theo dõi ngoại trú; 7 trường hợp xạm
da, 3 dậy thì sớm đang điều trị, 2 trẻ nữ có dấu hiệu cường androgen, 1 trẻ có dấu hiệu phì đại
nhẹ âm vật, không có trẻ nào bị suy thượng thận cấp.
TCNCYH 115 (6) - 2018 49
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
Hình 1. Phả hệ và kiểu gen gia đình mang đột biến dị hợp tử kép
IVS2 - 13A/C > G/Q318X&R356W
Phân tích phả hệ ở thế hệ 1 và 2, không ai mắc bệnh giống bệnh nhân. Ở thế hệ thứ 3 gia
đình có hai con gái đầu bị mất trong thời kỳ sơ sinh, 1 con trai 2 tuổi bị bệnh tăng sản thượng
thận bẩm sinh thể mất muối với kiểu gen I2g và 2 đột biến trên cùng 1 alen p.Q138X & R356W.
Bố mẹ và chị gái (III.3) có kiểu hình bình thường. Phân tích gen cho gia đình: đột biến I2g,
p.Q318X&p.R356W. Bố mang đột biến dị hợp tử kép p.Q318X và p.R356W mẹ mang gen dị hợp
tử I2g. Bệnh nhân nhận 1 alen p.Q318X và p.R356W từ bố và 1 alen I2g từ mẹ.
c.656A/C
IVS2 - 13A/C > G
c.1996C > T
P.Q138X
c.2110C > T
p.R356W
Mẹ bệnh nhân II4 Bố bệnh nhân II3 Bố bệnh nhân II3
c.656A/C
c.IVS2 - 13A/C > G
c.1996C > T
P.Q138X
c.2110C > T
p.R356W
Mẹ bệnh nhân III4 Bố bệnh nhân III4 Bố bệnh nhân III4
50 TCNCYH 115 (6) - 2018
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
IV. BÀN LUẬN
Phân tích gen bằng kỹ thuật MLPA và giải
trình tự gen cho 27 bệnh nhân được chẩn
đoán tăng sản thượng thận bẩm sinh thể mất
muối nặng được khám và điều trị ngoại trú tại
khoa Nội tiết- Di truyền- Chuyển hóa tại Bệnh
viện Nhi Trung ương, chúng tôi nhận thấy
dạng đột biến điểm chiếm tỷ lệ cao là 61,1%,
kiểu gen hay gặp nhất R356W có tỷ lệ 40,7%,
đột biến mất đoạn chiếm tỷ lệ cao 38,9%. Đột
biến của gen CYP21A2 đã được nghiên cứu
rộng rãi ở nhiều nước trên thế giới, cho đến
nay đã có hơn 150 đột biến khác nhau đã
được báo cáo [2; 5]. Tăng sản thượng thận
bẩm sinh thể mất muối nặng 100% ở các
dạng đột biến ở exon 8 như R356W, Q318X,
exon 3 như S125X, vị trí intron 2, và các mất
đoạn lớn làm thay đổi hoàn toàn cấu trúc của
gen CYP21A2 dẫn đến không tổng hợp được
enzym 21 - OH. Kết quả nghiên cứu của
chúng tôi trên nhóm bệnh nhân tăng sản
thượng thận bẩm sinh thể mất muối nặng nên
tỷ lệ đột biến mất đoạn có tăng cao hơn các
nghiên cứu khác vì đây là một dạng đột biến
phức tạp 100% gây thể mất muối. Trong đó, tỷ
lệ gặp đột biến này ở các nước Iraq 19,3%,
Châu Á, như Trung Quốc (20%), Nhật Bản
(18%) [2; 7; 8]. Tăng sản thượng thận bẩm
sinh thể mất muối là một thể nặng của bệnh,
có nguy cơ tử vong do cơn suy thượng thận
cấp, trong 27 bệnh nhân nghiên cứu của
chúng tôi, không có bệnh nhân tái khám bị suy
thượng thận, nhưng có 3 trường hợp đang
điều trị dậy thì sớm tại khoa, 7 trường hợp
còn dấu hiệu xạm da, 2 trường hợp nữ còn
dấu hiệu cường androgen kèm 1 bệnh nhân
phì đại nhẹ âm vật, do bệnh nhân ở xa, không
tuân thủ tái khám đúng hẹn và điều trị thuốc
với liều chưa đúng.
Phân tích phả hệ của 27 gia đình mang
gen đột biến CYP21A2, chúng tôi nhận thấy
100% bố, mẹ mang gen dị hợp tử. Có 6 anh,
chị, em, bệnh nhân được phân tích gen có 4
trường hợp mang gen dị hợp tử, chỉ có 2 ca
không mang gen bệnh. Có 2 gia đình, có bố,
mẹ mang gen dị hợp tử kép Q318X và
R356W. Trong đó 1 gia đình có bố mang dị
hợp tử kép Q318X và R356W, mẹ mang gen
I2g, bệnh nhân bị tăng sản thượng thận bẩm
sinh thể rất nặng. Bệnh nhân có 2 người chị
gái đã mất ở thời kỳ sơ sinh không rõ chẩn
đoán, 1 chị gái đã lớn đi lấy chồng xa. Bệnh
nhân có rất nhiều lần vào viện cấp cứu vì cơn
suy thượng thận cấp nguy hiểm đến tính mạng.
Trong một nghiên cứu mới ở Ai Cập
(2018), đã phân tích kiểu gen và kiểu hình cho
14 bệnh nhân và gia đình có người bị bệnh
tăng sản thượng thận bẩm sinh thể thiếu
enzym 21 - OH nhận thấy tỷ lệ các dạng đột
biến điểm chiếm tỷ lệ cao, nhưng khi phân tích
từng ca lâm sàng thì có nhiều trường hợp kiểu
gen và kiểu hình không tương xứng với nhau.
Nghiên cứu chỉ rõ kiểu gen IVS2 - 13/A/C > G
có thể có kiều hình mất muối hoặc nam hóa
đơn thuần, kiểu gen Q318X đồng hợp tử luôn
luôn có kiểu hình mất muối, nhưng một vài
trường hợp dị hợp tử kép thì lại có kiểu hình
nam hóa đơn thuần [9]. Kiểu gen và kiểu hình
của bệnh nhân tăng sản thượng thận bẩm
sinh đã có nhiều nghiên cứu đã được báo
cáo, để bổ sung vào dữ liệu di truyền giúp cho
các bác sĩ trong tư vấn chẩn đoán trước sinh
và quản lý bệnh nhân. Đây là bước tiền đề để
chúng tôi chẩn đoán trước sinh cho các mẹ,
hoặc chị, em gái bệnh nhân khi mang thai, để
tránh sinh ra một đứa trẻ bị bệnh hoặc có kế
hoạch điều trị sớm cho các bệnh nhân được
chẩn đoán sớm từ thời kỳ bào thai [10; 11].
Trong số 27 gia đình này chúng tôi đã tiến
TCNCYH 115 (6) - 2018 51
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
hành chẩn đoán trước sinh cho 1 thai phụ đã
có kết quả bước đầu phát hiện 1 thai nhi
mang gen dị hợp tử.
Phát hiện đột biến gen CYP21A2 trên bệnh
nhân và các thành viên gia đình có giá trị cao
giúp bác sĩ chẩn đoán trước sinh cho các thai
nhi ngay từ những tháng đầu mang thai để
điều trị sớm và tư vấn tiền hôn nhân, cung cấp
dữ liệu cho trung tâm di truyền để quản lý
người mang gen làm giảm tỷ lệ mắc bệnh cho
cộng đồng.
IV. KẾT LUẬN
Sử dụng kỹ thuật PCR, MLPA và giải trình
tự gen đã phát hiện được 96,7 % người lành
mang gen bệnh của các thành viên gia đình
bệnh nhân. Trong số đột biến điểm thì đột
biến R356W chiếm tỉ lệ cao nhất với 40,7%,
tiếp theo là đột biến Q318X chiếm 9,3% và
IVS2 - 13A/C > G chiếm 7,4%. Đột biến mất
đoạn chiếm 38,9% đây là một dạng đột biến
luôn biểu hiện kiểu hình thể mất muối nặng
cho bệnh nhân.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Saroj. N, New. M. I (2011). Congenital
adrenal hyperplasia due to 21 – hydroxylase
deficiency. Annals of the new york academy of
sciences, 1192, 5 - 11.
2. White. P.C, Speiser.P.W (2000). Con-
genital adrenal hyperplasia due to 21- hy-
droxylase deficiency. Endocrine reviews, 21
(3), 245 - 291.
3. Lee. H. H (2004). The chimeric CYP21P/
CYP21 gene and 21-hydroxylase deficiency.
Journal Hum Genet, 49, 65 - 72.
4. Baumgartner-Parzer. S.M, Nowotny. P
(2004). Carrier frequency of congenital adre-
nal hyperplasia (21-hydroxylase deficiency) in
a Middle European population. The journal of
clinical Endocrinology & Metabolism, 90(2),
775 - 778.
5. Anastasovska.V., Kocova. M (2010).
Detected heterozygouts during the molecular
analysis of the common CYP21A2 point muta-
tions in Macedonian patients with congenital
adrenal hyperplasia and their relatives. Sec,
Biol.Med.Sci, MASA, XXXI, 2, 71 - 82.
6. Tạ Thành Văn (2010). PCR và một số
kỹ thuật y sinh học phân tử. Nhà xuất bản Y
học, 28 - 32.
7. Ruqayah G. Y.A, Bassam M. S.A
(2016). Molecular analysis of CYP21A2 gene
mutations among Iraqi patients with congenital
adrenal. Hindawi Publishing Corporation. En-
zyme Research, 4, 117 - 124.
8. Angel.O.K Chan, But.M.W (2011). Mo-
lecular analysis of congenital adrenal hyper-
plasia due to 21- hydroxylase deficiency in
Hong Kong Chinese patients. Steroids, 76,
1057 - 1062.
9. Fatma E, Sahar S, Mona H et al (2018).
CYP21A2 genetic profile in 14 Egyptian chil-
dren with suspected congenital adrenal hyper-
plasia: a diagnostic challenge. Annals of the
new York academy of sciences, 1415, 11 - 20.
10. Fernanda B Coeli., Fernanda C
Soardi et al (2010). Novel deletion alleles car-
rying CYP21A1P/A2 chimeric genes in Brazil-
ian patients with 21-hydroxylase deficiency.
BMC medical Genetics, 1 - 7.
11. Finkielstain GP., Chen W., Mehta
SP., Fujimura FK et al (2011). Comprehen-
sive genetic analysis of 182 unrelated families
with congenital adrenal hyperplasia due to 21-
hydroxylase deficiency, J Clin Endocrinol Me-
tab, 96 (1), 161 - 172.
52 TCNCYH 115 (6) - 2018
TẠP CHÍ NGHIÊN CỨU Y HỌC
Summary
CYP21A2 GENOTYPE STUDY IN PATIENTS AND THEIR FAMILY
MEMBER WITH CONGENITAL ADRENAL HYPERPLASIA DUE
TO 21-OH DEFICIENCY
Congenital adrenal hyperplasia (CAH) caused x by 21- hydroxylase deficiency (CAH-21OH) is
an autosomal recessive genetic disorder due to mutation in the CYP21A2 gene. Objective: to
identify CYP21A2 genotype of patients and the familly members using sequencing and MLPA
methods. Patients and method: Mutation analysis of the CYP21A2 was performed on 27 patients
and 60 family members with congenital adrenal hyperplasia due to 21-hydroxylase deficiency.
100% of CAH patients were found to have mutation in CYP21A2 gene. 5 types of mutations have
been detected. Point mutation is accounted for 61.1%, the most commont point mutation was
R356W (40.7%), following are IVS2-13A/C > G (9.3%), Q318X (9.3%), S125X (3.7%). We also
detected 38.9% large deletion mutation in patient group. 96.7% (58/60) of the family members
were detected to have heterozygous mutation. Only one generation of the whole pedigrees will be
diagnosed with CAH and only one out of two children from the same family with have this
disorder.
Keywords: congenital adrenal hyperplasia,salt wasting, CYP21A2 gene